Er zijn twee belangrijke bronnen van besmetting in cleanrooms: deeltjes en micro-organismen. Deze kunnen worden veroorzaakt door menselijke en omgevingsfactoren, of door gerelateerde activiteiten in het proces. Ondanks alle inspanningen zal besmetting toch de cleanroom binnendringen. Specifieke, veelvoorkomende besmettingsbronnen zijn onder meer menselijke lichamen (cellen, haar), omgevingsfactoren zoals stof, rook, nevel of apparatuur (laboratoriumapparatuur, reinigingsapparatuur), en onjuiste veegtechnieken en reinigingsmethoden.
De meest voorkomende besmettingsbron zijn mensen. Zelfs met de strengste kleding en de strengste werkprocedures vormen slecht getrainde operators de grootste besmettingsdreiging in cleanrooms. Medewerkers die de cleanroomrichtlijnen niet volgen, vormen een hoog risico. Zolang één medewerker een fout maakt of een stap vergeet, leidt dit tot besmetting van de hele cleanroom. Het bedrijf kan de netheid van de cleanroom alleen garanderen door continue monitoring en continue bijscholing, met een besmettingspercentage van nul.
Andere belangrijke bronnen van besmetting zijn gereedschap en apparatuur. Als een kar of machine slechts ruw wordt afgeveegd voordat deze de cleanroom binnenkomt, kunnen er micro-organismen in terechtkomen. Vaak zijn werknemers zich er niet van bewust dat apparatuur met wielen over besmette oppervlakken rolt wanneer deze de cleanroom in wordt geduwd. Oppervlakken (zoals vloeren, wanden, apparatuur, enz.) worden routinematig getest op levensvatbare aantallen met behulp van speciaal ontworpen contactplaten met groeimedia zoals Trypticase Soy Agar (TSA) en Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA is een groeimedium dat is ontworpen voor bacteriën, en SDA is een groeimedium dat is ontworpen voor schimmels en gisten. TSA en SDA worden doorgaans geïncubeerd bij verschillende temperaturen, waarbij TSA wordt blootgesteld aan temperaturen tussen 30 en 35 °C, de optimale groeitemperatuur voor de meeste bacteriën. Het bereik van 20 tot 25 °C is optimaal voor de meeste schimmel- en gistsoorten.
Luchtstroom was ooit een veelvoorkomende oorzaak van besmetting, maar de huidige HVAC-systemen voor cleanrooms hebben luchtverontreiniging vrijwel volledig geëlimineerd. De lucht in cleanrooms wordt regelmatig (bijvoorbeeld dagelijks, wekelijks, per kwartaal) gecontroleerd en gemonitord op deeltjesaantallen, kiemgetallen, temperatuur en luchtvochtigheid. HEPA-filters worden gebruikt om het aantal deeltjes in de lucht te regelen en kunnen deeltjes tot 0,2 µm filteren. Deze filters werken meestal continu met een gekalibreerde stroomsnelheid om de luchtkwaliteit in de ruimte te handhaven. De luchtvochtigheid wordt meestal laag gehouden om de groei van micro-organismen zoals bacteriën en schimmels, die een vochtige omgeving prefereren, te voorkomen.
De grootste en meest voorkomende bron van besmetting in een cleanroom is de operator.
De bronnen en toegangswegen van besmetting verschillen niet significant van sector tot sector, maar er zijn wel verschillen tussen sectoren wat betreft de toelaatbare en onaanvaardbare besmettingsniveaus. Fabrikanten van in te nemen tabletten hoeven bijvoorbeeld niet dezelfde mate van reinheid te handhaven als fabrikanten van injecteerbare middelen die rechtstreeks in het menselijk lichaam worden ingebracht.
Farmaceutische fabrikanten hebben een lagere tolerantie voor microbiële besmetting dan fabrikanten van hightech elektronica. Halfgeleiderfabrikanten die microscopisch kleine producten produceren, kunnen geen enkele deeltjesverontreiniging accepteren om de functionaliteit van het product te garanderen. Daarom maken deze bedrijven zich alleen zorgen over de steriliteit van het product dat in het menselijk lichaam wordt geïmplanteerd en de functionaliteit van de chip of mobiele telefoon. Ze maken zich relatief minder zorgen over schimmels, zwammen of andere vormen van microbiële besmetting in cleanrooms. Farmaceutische bedrijven daarentegen maken zich zorgen over alle levende en dode bronnen van besmetting.
De farmaceutische industrie wordt gereguleerd door de FDA en moet zich strikt houden aan de Good Manufacturing Practices (GMP)-regelgeving, omdat de gevolgen van besmetting in de farmaceutische industrie zeer schadelijk zijn. Farmaceutische fabrikanten moeten er niet alleen voor zorgen dat hun producten vrij zijn van bacteriën, ze moeten ook alles documenteren en bijhouden. Een bedrijf dat hightechapparatuur produceert, mag een laptop of tv verzenden, zolang deze maar de interne audit doorstaat. Maar voor de farmaceutische industrie is het niet zo eenvoudig. Daarom is het cruciaal dat een bedrijf cleanroomprocedures heeft, gebruikt en documenteert. Vanwege kostenoverwegingen huren veel bedrijven externe professionele schoonmaakdiensten in om schoonmaakwerkzaamheden uit te voeren.
Een uitgebreid testprogramma voor cleanroomomgevingen zou zichtbare en onzichtbare deeltjes in de lucht moeten omvatten. Hoewel er geen vereiste is dat alle verontreinigingen in deze gecontroleerde omgevingen door micro-organismen worden geïdentificeerd, dient het testprogramma voor omgevingscontrole een passend niveau van bacteriële identificatie van monsterextracties te omvatten. Er zijn momenteel veel bacteriële identificatiemethoden beschikbaar.
De eerste stap bij bacteriële identificatie, met name bij isolatie in cleanrooms, is de gramkleuringsmethode, omdat deze interpretatieve aanwijzingen kan geven over de bron van microbiële besmetting. Als de microbiële isolatie en identificatie grampositieve kokken aantoont, kan de besmetting afkomstig zijn van mensen. Als de microbiële isolatie en identificatie grampositieve staafjes aantoont, kan de besmetting afkomstig zijn van stof of desinfectiemiddelresistente stammen. Als de microbiële isolatie en identificatie gramnegatieve staafjes aantoont, kan de besmetting afkomstig zijn van water of een nat oppervlak.
Microbiële identificatie in farmaceutische cleanrooms is zeer noodzakelijk omdat het verband houdt met vele aspecten van kwaliteitsborging, zoals bioassays in productieomgevingen; bacteriële identificatietests van eindproducten; niet-geïdentificeerde organismen in steriele producten en water; kwaliteitscontrole van fermentatieopslagtechnologie in de biotechnologische industrie; en microbiële testverificatie tijdens validatie. De FDA-methode om te bevestigen dat bacteriën in een specifieke omgeving kunnen overleven, zal steeds gebruikelijker worden. Wanneer microbiële besmettingsniveaus de gespecificeerde norm overschrijden of steriliteitstestresultaten besmetting aangeven, is het noodzakelijk om de effectiviteit van reinigings- en desinfectiemiddelen te verifiëren en de identificatie van besmettingsbronnen te elimineren.
Er zijn twee methoden voor het monitoren van oppervlakken in cleanrooms:
1. Contactplaten
Deze speciale kweekschalen bevatten steriel groeimedium, dat zo is voorbereid dat het hoger is dan de rand van de schaal. De contactplaat bedekt het te bemonsteren oppervlak en eventuele zichtbare micro-organismen hechten zich aan het agaroppervlak en incuberen. Deze techniek kan het aantal zichtbare micro-organismen op een oppervlak weergeven.
2. Swab-methode
Dit is steriel en wordt bewaard in een geschikte steriele vloeistof. Het wattenstaafje wordt op het testoppervlak aangebracht en het micro-organisme wordt geïdentificeerd door het wattenstaafje in het medium te vangen. Wattenstaafjes worden vaak gebruikt op oneffen oppervlakken of op plaatsen die moeilijk te bemonsteren zijn met een contactplaat. Het nemen van een wattenstaafje is meer een kwalitatieve test.
Plaatsingstijd: 21-10-2024