Er zijn twee belangrijke bronnen van besmetting in cleanrooms: deeltjes en micro-organismen, die veroorzaakt kunnen worden door menselijke en omgevingsfactoren, of daaraan gerelateerde activiteiten in het proces. Ondanks alle inspanningen zal verontreiniging nog steeds in de cleanroom binnendringen. Specifieke veel voorkomende besmettingsdragers zijn onder meer menselijke lichamen (cellen, haar), omgevingsfactoren zoals stof, rook, nevel of apparatuur (laboratoriumapparatuur, reinigingsapparatuur) en onjuiste veegtechnieken en reinigingsmethoden.
De meest voorkomende besmettingsdrager zijn mensen. Zelfs met de strengste kleding en de strengste bedieningsprocedures vormen onjuist opgeleide operators de grootste bedreiging voor besmetting in cleanrooms. Medewerkers die de cleanroomrichtlijnen niet volgen vormen een risicofactor. Zolang één medewerker een fout maakt of een stap vergeet, leidt dit tot vervuiling van de gehele cleanroom. Het bedrijf kan de netheid van de cleanroom alleen garanderen door voortdurende monitoring en voortdurende bijwerking van de training zonder besmettingspercentage.
Andere belangrijke bronnen van besmetting zijn gereedschappen en apparatuur. Als een kar of een machine slechts grof wordt afgeveegd voordat deze de cleanroom binnengaat, kunnen er micro-organismen in terechtkomen. Vaak zijn werknemers zich er niet van bewust dat apparatuur op wielen over vervuilde oppervlakken rolt wanneer deze de cleanroom in wordt geduwd. Oppervlakken (inclusief vloeren, muren, apparatuur, enz.) worden routinematig getest op levensvatbare aantallen met behulp van speciaal ontworpen contactplaten die groeimedia bevatten zoals Trypticase Soy Agar (TSA) en Sabouraud Dextrose Agar (SDA). TSA is een groeimedium ontworpen voor bacteriën, en SDA is een groeimedium ontworpen voor schimmels en gisten. TSA en SDA worden doorgaans bij verschillende temperaturen geïncubeerd, waarbij TSA wordt blootgesteld aan temperaturen in het bereik van 30-35˚C, wat de optimale groeitemperatuur is voor de meeste bacteriën. Het bereik van 20-25˚C is optimaal voor de meeste schimmel- en gistsoorten.
Luchtstroom was ooit een veel voorkomende oorzaak van verontreiniging, maar de huidige HVAC-systemen in cleanrooms hebben luchtverontreiniging vrijwel geëlimineerd. De lucht in de cleanroom wordt regelmatig (bijvoorbeeld dagelijks, wekelijks, driemaandelijks) gecontroleerd en gemonitord op deeltjesaantallen, levensvatbare aantallen, temperatuur en vochtigheid. HEPA-filters worden gebruikt om het aantal deeltjes in de lucht te controleren en hebben de mogelijkheid om deeltjes tot 0,2 µm uit te filteren. Deze filters worden doorgaans continu ingeschakeld met een gekalibreerd debiet om de luchtkwaliteit in de kamer op peil te houden. De luchtvochtigheid wordt doorgaans op een laag niveau gehouden om de verspreiding van micro-organismen, zoals bacteriën en schimmels, die de voorkeur geven aan vochtige omgevingen, te voorkomen.
In feite is de operator het hoogste niveau en de meest voorkomende bron van besmetting in cleanrooms.
De bronnen en toegangsroutes van besmetting variëren niet significant van bedrijfstak tot bedrijfstak, maar er zijn wel verschillen tussen bedrijfstakken in termen van aanvaardbare en onaanvaardbare besmettingsniveaus. Fabrikanten van inneembare tabletten hoeven bijvoorbeeld niet hetzelfde niveau van reinheid te handhaven als fabrikanten van injecteerbare middelen die rechtstreeks in het menselijk lichaam worden ingebracht.
Farmaceutische fabrikanten hebben een lagere tolerantie voor microbiële besmetting dan fabrikanten van hightech elektronica. Fabrikanten van halfgeleiders die microscopische producten produceren, kunnen geen enkele verontreiniging door deeltjes accepteren om de functionaliteit van het product te garanderen. Daarom maken deze bedrijven zich alleen zorgen over de steriliteit van het product dat in het menselijk lichaam wordt geïmplanteerd en de functionaliteit van de chip of mobiele telefoon. Ze maken zich relatief minder zorgen over schimmels of andere vormen van microbiële besmetting in cleanrooms. Aan de andere kant maken farmaceutische bedrijven zich zorgen over alle levende en dode besmettingsbronnen.
De farmaceutische industrie wordt gereguleerd door de FDA en moet zich strikt houden aan de Good Manufacturing Practices (GMP)-voorschriften, omdat de gevolgen van besmetting in de farmaceutische industrie zeer schadelijk zijn. Geneesmiddelenfabrikanten moeten er niet alleen voor zorgen dat hun producten vrij zijn van bacteriën, ze moeten ook over documentatie beschikken en alles bijhouden. Een hightech-apparatuurbedrijf kan een laptop of tv verzenden zolang het de interne audit doorstaat. Maar voor de farmaceutische industrie is dat niet zo eenvoudig. Daarom is het voor een bedrijf van cruciaal belang om operationele procedures voor cleanrooms te hebben, te gebruiken en te documenteren. Vanwege kostenoverwegingen huren veel bedrijven externe professionele schoonmaakdiensten in om schoonmaakdiensten uit te voeren.
Een uitgebreid milieutestprogramma voor cleanrooms moet zichtbare en onzichtbare deeltjes in de lucht omvatten. Hoewel er geen vereiste is dat alle verontreinigingen in deze gecontroleerde omgevingen door micro-organismen worden geïdentificeerd. Het milieucontroleprogramma moet een passend niveau van bacteriële identificatie van monsterextracties omvatten. Er zijn momenteel veel bacteriële identificatiemethoden beschikbaar.
De eerste stap bij bacteriële identificatie, vooral als het gaat om isolatie in cleanrooms, is de Gram-kleuringmethode, omdat deze interpretatieve aanwijzingen kan opleveren voor de bron van microbiële besmetting. Als de microbiële isolatie en identificatie Gram-positieve kokken aantoont, kan de besmetting afkomstig zijn van mensen. Als de microbiële isolatie en identificatie Gram-positieve staafjes vertoont, kan de besmetting afkomstig zijn van stof- of desinfectiemiddelresistente stammen. Als de microbiële isolatie en identificatie Gram-negatieve staafjes aantoont, kan de besmettingsbron afkomstig zijn van water of een nat oppervlak.
Microbiële identificatie in farmaceutische cleanrooms is zeer noodzakelijk omdat het verband houdt met veel aspecten van kwaliteitsborging, zoals bioassays in productieomgevingen; bacteriële identificatietesten van eindproducten; naamloze organismen in steriele producten en water; kwaliteitscontrole van fermentatieopslagtechnologie in de biotechnologische industrie; en microbiële testverificatie tijdens validatie. De methode van de FDA om te bevestigen dat bacteriën in een specifieke omgeving kunnen overleven, zal steeds gebruikelijker worden. Wanneer de microbiële besmettingsniveaus het gespecificeerde niveau overschrijden of de resultaten van steriliteitstests wijzen op besmetting, is het noodzakelijk om de effectiviteit van reinigings- en desinfectiemiddelen te verifiëren en de identificatie van besmettingsbronnen te elimineren.
Er zijn twee methoden voor het monitoren van omgevingsoppervlakken in cleanrooms:
1. Contactplaten
Deze speciale kweekschalen bevatten steriel groeimedium, dat hoger bereid is dan de rand van de schaal. De contactplaatafdekking bedekt het te bemonsteren oppervlak en eventuele micro-organismen die op het oppervlak zichtbaar zijn, zullen zich aan het agaroppervlak hechten en incuberen. Deze techniek kan aantonen hoeveel micro-organismen zichtbaar zijn op een oppervlak.
2. Zwabbermethode
Deze is steriel en wordt bewaard in een geschikte steriele vloeistof. Het wattenstaafje wordt op het testoppervlak aangebracht en het micro-organisme wordt geïdentificeerd door het wattenstaafje in het medium terug te vinden. Swabs worden vaak gebruikt op oneffen oppervlakken of op plaatsen die moeilijk te bemonsteren zijn met een contactplaat. Swab-bemonstering is meer een kwalitatieve test.
Posttijd: 21 oktober 2024